目的探讨急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia，APL)患者治疗前后血浆H2S浓度变化及意义。方法随机选取初治APL住院患者26例为病例组，健康体检者26例为对照组。去蛋白法测定血浆H2S浓度，比较病例组患者急性发病期、临床缓解期血浆H2S浓度与健康对照组之间的差异。结果病例组患者急性发病期血浆H2S浓度明显升高，与临床缓解期和对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)；病例组经治疗后进入临床缓解期的患者血浆H2S浓度下降，接近健康对照组，差异无统计学意义(P>0.01)。结论内源性H2S参与了APL发生发展的病理生理过程。


目前研究发现气体信号分子H2S在人体具有重要的生理和病理生理调节作用，并与多种疾病的发生、发展、转归密切相关。但有关H2S与急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia，APL)关系的研究报道少见。我们检测了初治APL患者治疗前后血浆H2S浓度的变化，探讨H2S在APL发病过程中的作用及意义。


1材料与方法


1.1一般资料


选取2014-01-01—2014-12-31河北北方学院附属第一医院收治的初治APL住院患者26例为病例组，诊断及疗效判断均符合《血液病诊断及疗效标准》，其中男12例，女14例；年龄19～52岁，中位年龄35岁；经治疗后，临床缓解病例22例，其中男9例，女13例。选取同期体检中心健康体检者26例为对照组，其中男12例，女14例；年龄22～50岁，中位年龄36岁。均排除心、脑、肺等主要脏器疾病。


1.2方法


1.2.1标本采集晨起抽取空腹静脉血2 mL，置EDTA-K2抗凝管，3 000 r·min-1离心10 min，吸血浆至EP管，置-75℃低温冰箱保存，待测H2S浓度。病例组中22例临床缓解病例治疗缓解后抽血复查。


1.2.2测定方法测定前血清标本室温复融，3 000 r·min-1离心10 min，取上清液，去蛋白法检测H2S浓度。首先用不同浓度NaHS标准液绘制标准曲线，直线回归方程为：Y=1513.1X±2.362，r2=0.998。反应在5 mL玻璃试管中完成，按序加入以下试剂：首先在玻璃试管中加入10 g·L-1醋酸锌0.5 mL，然后加入血浆标本0.1 mL，振荡摇匀，再依次加入20 mmol·L-1对苯二胺盐酸盐0.5 mL和30 mmol·L-1三氯化铁0.5 mL，室温孵育20 min使其充分反应，再加入1 mL 10%三氯醋酸使蛋白沉淀，最后加入2.5 mL蒸馏水补足体积至5mL，再次充分混匀，6 000 r·min-1离心5 min，吸出上清液，722分光光度计在670 nm波长处测吸光度，根据绘好的H2S标准曲线计算出上清液中H2S含量，单位:μmol·L-1。

1.3统计学方法


2结果


APL患者急性发病期H2S浓度为(88.32±7.12)μmol·L-1，临床缓解期H2S浓度为(46.75±5.94)μmol·L-1；正常对照组H2S浓度为(45.8±6.11)μmol·L-1。病例组急性发病期与正常对照组相比H2S含量明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)；临床缓解期与急性发病期相比H2S含量明显降低，差异有统计学意义(P&lt;0.01)；临床缓解期与正常对照组相比H2S含量差异无统计学意义(P>0.05)。


3讨论


H2S是毒性气体，近年研究发现H2S在人体内也有产生，是人类发现的第三个气体信使分子，是在体内由含硫氨基酸如同型半胱氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸等在磷酸吡多醛-5’-磷酸依赖性酶(包括CBS、CSE)、半胱氨酸转移酶等催化作用下产生的代谢产物。有研究表明内源性H2S参与了许多临床疾病的病理生理过程，例如肾病、左心室肥厚、脑梗死、肿瘤、胰腺炎等。


本研究发现APL急性发病期患者血浆H2S浓度明显升高，经治疗缓解后H2S浓度回降至接近正常对照组，表明内源性JD足球反波胆APP下载H2S参与了APL的病理生理过程。其机制我们认为可能为：①某种原因导致生成H2S的原料(如同型半胱氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸)增加；②生成H2S的酶(如CBS、CSE等)生成增多和(或)活性升高；③H2S在体内的清除速度减缓。研究发现H2S对多种癌细胞增殖与凋亡有调节作用，在APL急性发病期，可能由于某种负反馈机制的存在，导致H2S浓度升高，升高的H2S促进了APL细胞凋亡并抑制了其增殖，减缓了APL的发展速度，是机体自我保护机制之一。临床缓解期患者血浆H2S浓度降至接近正常水平，表明了这种负反馈机制的存在。至于确切原因，有待进一步深入研究。